BCA法为何成为Western Blot标配？
CCK-8实验结束后，如果后续需要进行Western Blot验证蛋白表达变化，第一步就是准确测定蛋白浓度，确保每个上样孔的蛋白总量一致。蛋白定量不准，会导致内参不齐、条带灰度无法比较，WB实验整个失败。
目前主流的蛋白定量方法包括BCA法、Bradford法（考马斯亮蓝法）和Lowry法，其中BCA法因兼容性好、灵敏度高、线性范围宽，成为Western Blot前蛋白定量的首选方法。
BCA法的原理： 在碱性条件下，蛋白质分子中的肽键结构可将Cu²+还原为Cu+（双缩脲反应），BCA试剂与Cu+特异性结合形成紫色络合物，在562nm波长处有强吸收峰，且吸光度值与蛋白质浓度在20-2000μg/mL宽范围内呈良好线性关系。
广州致佳生物的ZJ0020-BCA Protein Assay Kit（蛋白定量试剂盒） 具有三大优势：
- 高灵敏度：最低检测浓度可达5μg/mL，可准确定量微量蛋白样品；
- 兼容性强：可与样品中一定浓度的去污剂（SDS、Triton X-100、Tween-20等）兼容，这对于RIPA裂解液提取的蛋白样品尤为重要（Bradford法易受去污剂干扰）；
- 高稳定性：BCA工作液室温可稳定保存24小时，显色反应后颜色稳定，1小时内吸光度变化很小，方便批量处理。
